Bolsa de PD em Bioquímica de Insetos

Post doctoral fellowship in Insect Biochemistry

• Resumo Summary

  Membranas microvilares intestinais e suas vesiculas secretoras em Spodoptera frugiperda (Lepidoptera) e Musca domestica (Diptera). 
  
  Em mamíferos, proteínas direcionadas à região apical do enterocito estão presentes em rafts de lipídeos. Essas são estruturas ricas em colesterol e glicoesfingolipídeos, mais resistentes a certos detergentes que o restante da membrana e podem ser purificadas por centrifugação em gradiente de densidade. 
  
  A incorporação de enzimas nesses rafts pode alterar suas atividades. A composição e propriedades das membranas microvilares intestinais de insetos são pouco conhecidas. A quantidade e variedade de roteínas nessa membrana aumentam em ordens de insetos mais derivadas e diferenças podem ser vistas também em partes distintas do trato intestinal. 
  
  Em Lepidoptera algumas porções do intestino secretam enzimas por um mecansmo microapócrino e, antes ou após fundirem-se coma membrana microvilar no topo da microvilosidade, são descarregadas para o lumen. Essas vesículas podem ser purificadas a partir do fluido ectoperirófico, um fluido que banha as microvilosidades. 
  
  Nós pretendemos isolar os rafts de lipídeos e as membranas microvilares totais de diferentes partes do intestino de S.frugiperda e M.domestica e vesículas microapócrinas de S.frugiperda. As preparações terão as composições de enzima e proteínas analisadas. 
  
  Interessados devem enviar carta justificando interesse no projeto, CV, sumário da carreira e cartas de recomendação para Dr. Walter R. Terra: warterra@iq.usp.br.

  Intestinal microvillar membranes and their secretory vesicles in Spodoptera frugiperda (Lepidoptera) and Musca domestica (Diptera).
   
  In mammals, proteins going to the intestinal apical membrane are present in lipid rafts. The lipid rafts are structures rich in cholesterol and glycosphingolipids, more resistant to certain detergents than the rest of the membrane and can be purified by density gradient centrifugation. 
  
  The incorporation of enzymes in the rafts can alter their activities. The composition and properties of insect intestinal microvillar membranes are poorly known. The amount and variety of proteins in this membrane increase in more derived insect orders and differences can also be seen in distinct parts of the intestinal tract. 
  
  In Lepidoptera some parts of the intestine secrete enzymes by a microapocrine mechanism, where small vesicles migrate through the cell microvilli and, before or after being fused with the microvillar membrane at the tips of the microvilli, are discharged into the lumen by a pinching- off process. These vesicles can be purified from the ectoperitrophic fluid, a fluid bathing the microvilli. 
  
  We intend to isolate lipid rafts and total microvilar membranes from different parts of the intestine of S.frugiperda and M.domestica and the microapocrine vesicles from S.frugiperda. The preparations will have the enzyme and protein composition analyzed and compared. 
  
  Desired skills: experience in small animal dissection, sub-cellular fractionation, density gradient centrifugation, analysis of protein by mass spectrometry.
  
  Applications will be considered until the 18th of June. 
  
  Documents for application: letter justifying interest for the project, cv, summary of career history, recommendation letters. Send application to: Dr. Walter R. Terra at warterra@iq.usp.br.