Bolsa de pós-doutorado em sinalização redox

Postdoctoral fellowship in redox signaling

• Resumo Summary

  O Projeto Temático "Regulação da homeostase redox e resposta integrada a estresse pela Dissulfeto Isomerase Proteica (PDI): mecanismos e papel na fisiopatologia e terapêutica de doenças vasculares", apoiado pela FAPESP, tem disponível uma Bolsa de Pós-Doutorado para inscrição e posterior seleção. 
  
  Resumo da proposta 
  A homeostase redox depende da geração controlada de espécies reativas de oxigênio (EROs) por sistemas enzimáticos como o complexo NADPH oxidase. O excesso de EROs tem sido implicado na ativação de vias de sinalização patológicas em um processo conhecido como estresse oxidativo. O aumento da geração de EROs pela NADPH oxidase está envolvido na fisiopatologia da hipertensão arterial em diversos modelos animais e também em humanos.
  Estudos recentes de nosso laboratório caracterizaram um importante papel da dissulfeto isomerase proteica (PDI) na regulação de NADPH oxidase(s). Entretanto, os mecanismos pelos quais a PDI controla a atividade e a expressão desta enzima não estão claros. Desta forma, o entendimento do mecanismo de regulação da oxidase pela PDI é a meta central do nosso projeto. 
  A NADPH oxidase presente em fagócitos (conhecida também como Nox 2) tem sido amplamente estudada na última década, e desta forma, constituí-se em um protótipo para o estudo de outras isoformas da Nox, como a vascular. A ativação da NADPH oxidase depende essencialmente da subunidade regulatória p47 phox que atua como uma organizadora central da enzima. 
  Nos estudos realizados pelo nosso grupo com neutrófilos, a utilização de inibidores da PDI praticamente aboliu a geração de superóxido, indicando uma associação funcional da PDI com a Nox fagocítica. Dados do nosso laboratório demonstraram também, uma interação redox da PDI com a subunidade regulatória da Nox, p47phox, indicando uma associação física entre essas proteínas durante o processo de ativação da enzima.
  Adicionalmente, modificações no estado redox da PDI foram capazes de modular a sua interação com o p47 phox e a geração de EROs pela oxidase. Desta forma o objetivo do presente projeto é caracterizar melhor a interação entre a PDI e a subunidade p47phox investigando seu papel na ativação da NADPH oxidase vascular e fagocítica. A interação PDI/p47phox pode representar um novo alvo terapêutico no controle do estresse oxidativo e tratamento de doenças cardiovasculares. 
  O projeto associado a esta bolsa de pós doutoramento requer experiência com ferramentas de biologia molecular incluindo expressão, mutagênese sítio dirigida e purificação de proteínas recombinantes. Características essenciais para a posição incluem um alto grau de motivação e capacidade de raciocínio mecanístico.

  Da documentação necessária à inscrição
  Os interessados deverão enviar até o dia 23 de abril de 2012 os documentos listados a seguir para a Profa. Dra. Lucia Rossetti Lopes, Pesquisadora Principal do Projeto Temático, por e-mail (llopes@usp.br). 
  1) Curriculum vitae atualizado; 
  2) Carta de apresentação indicando a razão de interesse na bolsa, com um breve relato de sua experiência profissional; 
  3) Carta de recomendação de dois pesquisadores ativos com respectivos e-mail para contato.

  Da seleção
  A seleção do bolsista será realizada em duas etapas: 1) análise da documentação recebida; 2) avaliação dos currículos dos candidatos habilitados. O resultado será enviado por email.

  Summary 
  The thematic project "Regulation of redox homeostasis and integrated stress response by Protein Disulfide Isomerase (PDI): mechanisms and role in the pathophysiology and therapy of vascular diseases" offers a postdoctoral fellowship in redox signaling.
  Redox homeostasis depends on the regulated production production of reactive oxygen species (ROS) via enzymatic sources such as the Nox family NADPH oxidase complex. The increased generation of ROS by Nox has been implicated in the activation of pathological pathways leading to oxidative stress and development of cardiovascular diseases such as hypertension. Recent studies from our laboratory revealed an important role of PDI in the regulation of NADPH oxidase activation. The goal of this project is to understand the mechanisms through which protein disulfide isomerase regulates ROS generation by Nox and the implications of this association in the development of cardiovascular diseases.
  The mechanism of activation of phagocytic Nox (Nox2) has been extensively studied because it represents a well known general model of other Nox isoforms, including the vascular one . Superoxide generation by the enzyme depends on the regulatory subunit p47phox which functions as an organizer of the enzyme complex. 
  Recently we demonstrated that PDI inhibitors abolished superoxide generation in neutrophils suggesting a functional association between PDI and Nox in these cells. We also demonstrated that the redox status of PDI is able to regulate the association of the protein with p47phox and proposed that PDI could represent a novel redox dependent organizer of NADPH oxidase. 
  The goal of the present study is to characterize the molecular mechanisms involved in the redox interaction between p47phox and PDI. The unraveling of the mechanisms involved in PDI regulation of NADPH oxidase will certainly provide important information in the regulation of cellular redox homeostasis by NADPH oxidase. 
  Additionally our studies could contribute to the development of inhibitors of vascular and phagocytic Nox activity, with potential therapeutic benefits in cardiovascular pathologies, such as arterial hypertension. The project assigned to this position requires previous experience with molecular biology specially protein expression, site directed mutagenesis and protein purification. 
  Essential to this position is a high degree of motivation and mechanistical thinking. 
  Please send CV and 2 letters of recommendation to llopes@usp.br by 04/23/2012. The selected candidate will be contacted by email.